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怎么测定唾液淀粉酶的最适ph

日期:2019-2-14(原创文章,禁止转载)

唾液淀粉酶(pancreaticamylase)是由唾液腺分泌的一种水解酶,而淀粉经唾液中淀粉酶的水解,生成糊精和麦芽糖。而知道唾液淀粉酶的最适ph对于自身有好处,那么唾液淀粉酶的最适ph是多少呢,又应该怎么测定唾液淀粉酶的最适ph?

在底物过量的条件下,相同时间内,在温度、酶浓度相同的条件下,接近最适 pH 的反应体系中消耗淀粉的量最大,剩余淀粉与过量碘液生成的颜色越浅,吸光度越小,利用分光光度计测出各管的吸光度后, 取处癫痫病人寿命是多少于升高与降低趋势之间的较小吸光度范围对应的 pH 值即为唾液淀粉酶的最适 pH。

一、 材料与方法 仪器:吸量管(5mL,1mL) ,试管,试如何专业的治疗癫痫管架,小烧杯, 722 型分光光度计,恒温箱,吸耳球 试剂:0.01mol/L 碘液,0.2mol/L 磷酸氢二钠,0.2mol/L 磷酸二氢钠,淀粉溶液,唾 液,蒸馏水

二、方法:相同时间内,在温度、酶浓度相同治疗癫痫病好吗、pH 不同的条件下,酶的活度不同,水解的淀粉量不同,剩余的淀粉与过量碘液生成的颜色不同,通过在660nm测量吸光度,得出酶的最适 pH 范围。

操作步骤:

1、唾液的获取:蒸馏水漱口后在口中含蒸馏水,适宜时间后将蒸馏水连同唾液一同放置于事先准备好的容器中即可,在实验过程中应注意酶的失活,为了防止此现象发生应将此液体置于冰水中冷却。

2、不同pH缓冲液配制:根据下表配置各个pH值的缓冲溶液各10ml

3、淀粉用量的确定(为了更好观察颜色变化,可以加入适量蒸馏水使总体积相同。混匀,观察现象,并选择颜色变化适中一支,记录其用量。)

4、酶液稀释倍数确定(为了更好观察颜色变化,可以加入适量蒸馏水使总体积相同,混匀,观察现象,并选择适中一支,记录其稀释倍数癫痫急救。)

5、最适pH确定(蒸馏水调零,测定660nm处吸光度A,最后以A为纵坐标,pH为横坐标作图,取曲线最低点对应的pH值,即为唾液淀粉酶的最适pH值。)

从上述的实验中或许可以得出6.8为曲线最低点对应的pH值,即为唾液淀粉酶的最适pH值。但是需要注意的是淀粉酶的测定结果受方法的影响较大,怎么测定唾液淀粉酶的最适ph?不同方法参考值亦有所不同,临床所用方法也较多,因此必须了解所用测定方法和其参考值,才能作出正确的诊断。

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